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高通量安排研磨儀分析南瓜雜交種純度
高通量安排研磨儀分析南瓜雜交種純度
上海五久自動化設備
在水稻、玉米、大豆、油菜等首要農作物上,SSR符號技術已成為一種遍及選用的純度判定辦法。SSR符號由于具有數量豐厚,多態性高,共顯性遺傳,操作簡潔,成果安穩牢靠等優點,已成為當今作物種類純度判定的抱負符號類型。且快速簡潔SSR檢查辦法也被研討建立起來,"南瓜SSR符號開發較遲,現在首要用于遺傳連鎖圖譜的構建,基因定位等基礎研討方面,而在應用研討上較少。高通量安排研磨儀能夠在研討制樣種類表現首要的作用。
將種子浸種lh后,置于墊有濾紙的發芽盒,37e,并留意保濕"發芽5一6天左右,取單粒發芽種子的胚軸約.05cm,放到.20mL離心管中,高通量安排研磨儀研碎;參加600林LCATB提取液,65e水浴10mni;參加等體積氯仿:異戊醇(24:1),充沛倒置混勻約10min,于120001丫11〕in離心10min;取上清液,加等體積預冷的異丙醇混勻(輕輕倒轉),于常溫下放置約30min,1200Or力1〕in離心10min;棄上清液,倒置使其天然風干或置于超凈作業臺讓其吹干,參加適當ddHZO溶解備用"
經過高通量安排研磨儀的參加研討,簡潔SSR檢查系統比慣例SSR檢查系統更簡略有用,但也存在提取的基因組DNA量較少!不易于保留的缺陷"此外,盡管本研討所用的檢查系統相關于慣例檢查系統大大減少了試劑用量,但理論上,在保證點樣量的前提下,還可將PCR反響系統進一步減小;為進步檢查功率,還可探索選用多重PCR,以便一起檢查多個位點的區別,因而,擴增系統還可進一步優化"在電泳檢查時,本研討僅點樣1次,關于合適引物的擴增產品,能夠探索點樣2次乃至多次,以便節省制膠本錢,這方面的作業需要依據擴增產品巨細進一步摸索。
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